选择生长健康的、无病害的番茄幼根。例如,70%乙醇或次氯酸钠等,用于表面消毒植物材料。
分离番茄幼根的原生质体通常涉及使用纤维素酶等酶来酶解细胞壁,从而释放原生质体。以下是一个一般的操作流程:![番茄幼根原生质体怎么用纤维素酶分离?](http://img.huaxili.com/d/file/20231115/13-231114152435612.png)
材料准备:
1. 番茄幼根:
选择生长健康的、无病害的番茄幼根。2. 表面消毒剂:
例如,70%乙醇或次氯酸钠等,用于表面消毒植物材料。3. 培养基:
含有植物生长激素(如激素、维生素等)的培养基,通常使用Murashige and Skoog培养基(MS培养基)。4. 纤维素酶:
用于酶解细胞壁,释放原生质体。5. 实验室用具:
显微镜、吸管、移液器、培养皿、滤纸等。步骤:
1. 表面消毒:
将番茄幼根在流水下清洗,去除表面的尘土。 将番茄幼根浸泡在70%乙醇或次氯酸钠等表面消毒剂中,进行表面消毒。消毒时间通常在几分钟到十几分钟之间。2. 剪取组织:
使用无菌工具,剪下表面消毒后的番茄幼根的根尖或幼根部分。这是富含分裂活跃细胞的部分,适合原生质体制备。3. 酶解:
将剪下的番茄幼根组织放入含有纤维素酶的培养基中,进行酶解。酶解的时间和温度根据实验设计和植物材料的特性而定,通常需要在无菌条件下进行操作。![番茄幼根原生质体怎么用纤维素酶分离?](http://img.huaxili.com/d/file/20231115/13-231114152451N0.png)