洋葱原生质体,首先要选择健康、生长良好的中等大小的洋葱鳞茎。然后需要准备包含细胞壁水解酶的酶溶液,如纤维素酶和果胶酶,以降解洋葱鳞茎的细胞壁。此外,还需要适当的培养基,通常含有植物生长激素,用于培养和分化洋葱的原生质体。
要制作洋葱原生质体,首先要选择健康、生长良好的中等大小的洋葱鳞茎。然后需要准备包含细胞壁水解酶的酶溶液,如纤维素酶和果胶酶,以降解洋葱鳞茎的细胞壁。此外,还需要适当的培养基,通常含有植物生长激素,用于培养和分化洋葱的原生质体。
1. 准备洋葱鳞茎组织:
将洋葱切成小块,去除外层鳞片,选择内部鳞茎组织。
2. 进行细胞壁水解:
将鳞茎组织放入酶溶液中,以适当的温度和时间条件进行细胞壁水解,导致细胞壁松弛,使细胞分离。
3. 滤除细胞壁残渣:
将处理后的组织过滤以去除细胞壁残渣,得到细胞悬液。
4. 洗涤:
对细胞悬液进行洗涤,以去除酶液残留。
5. 制备原生质体:
将洗净的细胞悬液置于含有适当植物激素的培养基中,提供适当的温度和光照条件。在这些条件下,洋葱细胞会形成原生质体。
6. 观察和分选:
使用显微镜观察原生质体的形成情况。根据需要,可以进行分选和收获。
7. 保存或进一步利用:
可以运用洋葱原生质体进行各种生物学实验,例如基因转化、融合等。为了保存它,需要将其置于适当的条件下,如低温或液氮中,并对其进行妥善存储。