选取健康的、无病害的芹菜植株。70%乙醇、次氯酸钠(NaClO)等用于表面消毒的溶液。
芹菜的原生质体培养是一种常见的植物细胞培养技术,用于研究植物生物学、基因工程和植物育种等领域。以下是进行芹菜原生质体培养的一般步骤:
材料和试剂准备:
1. 植物材料:
选取健康的、无病害的芹菜植株。2. 消毒溶液:
70%乙醇、次氯酸钠(NaClO)等用于表面消毒的溶液。3. 培养基:
包括植物生长激素(激素)的培养基,如MS培养基(Murashige and Skoog培养基)。步骤:
1. 表面消毒:
将芹菜植株的茎段表面消毒,以防止外部微生物的污染。使用70%的乙醇或次氯酸钠浸泡,然后用无菌水洗净。2. 质体切割:
将表面消毒后的茎段切成小段,约为1-2厘米。这些小段将被用于质体的制备。3. 酶解:
将茎段放入含有适当酶解酶的培养基中,如植物生长激素和维生素的MS培养基,然后放置在暗处。酶解酶有助于分解细胞壁,释放质体。4. 过滤和洗涤:
将酶解的混合物通过滤纸或滤器筛选,然后用含有适当植物生长激素的培养基洗涤残渣。